發(fā)布時(shí)間：2013-07-19來(lái)源：朱丹萍 供稿：干細(xì)胞所 宋軍，科教處 管韻苗
中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院賴(lài)良學(xué)博士和裴端卿博士領(lǐng)導(dǎo)的研究團(tuán)隊(duì)將轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶（TALENs）技術(shù)應(yīng)用于兔基因敲除研究，建立了兔基因打靶的高效平臺(tái)。并利用該技術(shù)平臺(tái)成功地將負(fù)責(zé)T細(xì)胞和B細(xì)胞重排的重組激活基因（RAG）敲除，建立了世界首例免疫缺陷家兔疾病模型，該成果于7月9日在線(xiàn)發(fā)表于國(guó)際著名期刊《Cell Research》上。
家兔是一種重要的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)其某些遺傳性狀進(jìn)行定向修飾，可大大地拓展家兔在生物醫(yī)藥研究領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值。但是，由于世界上還沒(méi)有建立起具有生殖系嵌合能力的家兔胚胎干細(xì)胞系，兔的克隆效率又極低，獲得基因敲除兔的難度極大，效率極低，目前，國(guó)際上只有一例基因敲除兔的報(bào)道。最近出現(xiàn)的TALEN技術(shù)，在其他動(dòng)物已證實(shí)，是一種高效、簡(jiǎn)便的基因修飾技術(shù)。本研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)探索，打通了TALENs在家兔基因打靶上的運(yùn)用技術(shù)路線(xiàn)。在對(duì)RAG基因進(jìn)行的敲除實(shí)驗(yàn)中，基因敲除效率達(dá)到了90%以上，雙等位基因敲除效率高達(dá)60%以上。TALEN介導(dǎo)的高效基因打靶技術(shù)平臺(tái)的建立，為大規(guī)模地對(duì)家兔進(jìn)行定向基因改造掃清了技術(shù)障礙。
本研究團(tuán)隊(duì)利用TALEN技術(shù)對(duì)RAG基因的成功敲除，導(dǎo)致T細(xì)胞和 B細(xì)胞發(fā)育阻滯，因此所獲得的RAG基因敲除兔喪失了絕大部分的免疫功能、由此培育出了世界首例免疫缺陷性家兔模型。該成果為生物醫(yī)學(xué)研究包括人類(lèi)相關(guān)疾病（如Omenn綜合征）發(fā)病機(jī)制、藥物開(kāi)發(fā)、器官移植研究和干細(xì)胞研究提供了重要?jiǎng)游锬Ｐ汀?/P>該研究獲“艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”國(guó)家科技重大專(zhuān)項(xiàng)資助。
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